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1、培养基制造注意事项

2、植物组织培养最常用MS培养基,包括十几种化合物。有些化合物相遇会发生化学反响发生沉积,影响培养基的营养成分,所以MS培养基须要制造多种高倍母液。

3、制造母液时,特别触及很多元素的母液时,必定要等一种成分溶解之后,再缓慢的添加另一种成分;牢记一锅煮,即不能将各种化合物一齐添加进去。

4、灭菌后培养基不凝胶或许凝胶偏软

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5、植物凝胶、琼脂都对酸性条件灵敏,pH值低于5很难成胶或凝胶偏软,牢记高压灭菌前调理培养基pH值(5-0)。植物凝胶对二价阳离子浓度有要求,也便是相对于MS培养基,1/2MS培养基中植物凝胶要适宜添加用量。

6、别的灭菌后,倒出培养基前必定将培养基摇匀(带防烫手套),由于琼脂密度大底层含量高,简单形成培养基强度不均匀。

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7、一般状况下在培养基中参加1~0mg/L的细胞分裂素(6-BA/KT/ZT),大都用0~0mg/L,KT浓度为5~2mg/L,浓度要根据试验资料来调整。细胞分裂素能够独自运用也能够与细胞生长素合作运用。

8、哪些植物激素能高压灭菌,哪些不能高压灭菌?

9、IBA、NAA、6-BA、2,4-D可高温高压灭菌。IAA、GA茉莉酸等不行高温高压灭菌,不然会分化失效,该类植物激素制造母液后需用22微孔滤膜过滤除菌,待培养基冷却(50-60℃)后没有凝胶前参加混匀。

10、培养基的pH值会凝胶硬度有无影响?

11、若将培养基pH值调的过高(大于6),则培养基偏硬,添加接种的阻力,会对外植体形成损害。


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